主题：猪人工授精精液稀释操作规程

一、精液化验室的准备工作
　　1、将设备打开备用：空调、双重蒸馏水器、预热箱、水浴锅、恒温载物台。检查恒温冰箱温度并检查保存精液的质量。
　　2、所有直接接触精液的器具用双蒸水冲洗备用。集精杯、精液瓶放预热箱预热。
　　3、稀释液的配制：精液稀释液宜先用现配。蒸馏水要求必须是双重蒸馏。根据需要选择不同保存时间的稀释粉。将稀释粉放入干净的容器，按比例加入双蒸水，放在磁力搅拌器上搅拌。待稀释粉溶解完全时，放在水浴锅中升温。

　　二、采精
　　1、采精频率：青年公猪和老年公猪每5天采精一次为宜，成年公猪可以每周2次。
　　2、采精方法：徒手采精是目前采用最广泛、有效最好的一种方法。
　　腹部擦洗消毒：采精人员戴两层一次性乳胶手套，挤掉包皮积尿后先用0.1%的高锰酸钾溶液将公猪包皮极其周围皮肤洗净消毒，再用清水擦洗公猪下腹部，最后将水分吸干。有些性欲旺盛的公猪，一进入采精室就会立即爬跨假母猪，所以此操作步骤一定要快。
　　引导公猪爬跨假母猪：一旦公猪爬跨完成，采精员应立即蹲到公猪左侧(如果是习惯左手采精则要选择公猪右侧)稍靠后的位置，并摘掉一层一次性手套，做采精准备。
　　公猪阴茎的把握：按摩公猪阴茎刺激，当公猪阴茎伸出时，用右手握住公猪阴茎前的螺旋部，不让阴茎来回转动，固定好阴茎后顺势轻轻地把阴茎全部拉出包皮外，注意把握阴茎的松紧度。有节奏调节压力来刺激性欲公猪，并将小指和无名指稍微张开露出阴茎前端，并用消毒纸将其擦拭干净。
　　接精：左手持集精杯收集精液。集精杯必须是保温的，并且是预热好的，杯口用橡皮圈固定交叉两层过滤纸过滤。公猪起初射出的精液多为精清，精子含量很少且常混有尿液和脏物，不宜收集，待射出乳白色精液时再收集。公猪第一次射精停止，再重复上述手法促使公猪第二、三次射精，直至射完为止。
　　3、采精结束：待公猪射完精后，采精员顺势用手将阴茎送入包皮内，让公猪自己慢慢地从假母猪上下来。采集的精液去掉过滤纸后迅速传递进入精液稀释化验室。

　　三、精液品质的检查
　　1、采精量：公猪的射精量平均为250毫升。可以用重量来计算，1g相当于1ml。
　　2、颜色和气味：正常的公猪精液颜色是乳白色或灰白色，具有一种特殊的腥味。精液乳白色程度越高，表明精子密度越大。颜色和气味异常的精液不宜使用。
　　3、 PH值：公猪精液正常的PH值在6.8-7.8之间，呈弱碱性，可用试纸进行测定。
　　4、精子密度：是指每毫升精液中所含的精子总数。目测误差较大，一般采用精子密度仪或精虫计数器来测定。
　　5、精子活力：是指精子的运动能力，用镜检视野中呈直线运动的精子数占精子总数的百分比来表示。检查方法是：取一滴精液在载玻片上，加盖盖玻片，然后放在显微镜下镜鉴，计算一个视野中呈直线运动的精子数目，来评定等级。一般分为十级，100%的精子都是直线运动为1.0级，90%为0.9级，80%的为0.8级，依次类推。活力在0.6级以下的精液不宜使用。
　　6、畸形精子率：正常精子形似蝌蚪，凡精子形态为卷尾、双尾、折尾、无尾、大头、小头、长头、双头、大颈、长颈等均为畸形精子。畸形精子的检查方法是：取原精液一滴，均匀涂在载玻片上，干燥1-2分钟后，用95%的酒精固定2分钟，用蒸馏水冲洗，再干燥片刻后，用美蓝或红蓝墨水染色3分钟，再用蒸馏水冲洗，干燥后即可镜检。镜检时，通常计算500个精子中的畸形精子数，求其百分率，一般猪的畸形精子率不能超过18%。

　　四、精液的稀释、标记、分装与保存
　　1、稀释后要求：稀释后精液要求活力达0.6以上，每份精液要求最低有效精子含量在40以上。
　　2、稀释过程：
　　确定稀释份数：精子密度x活力x精液量/40亿=可稀释份数
　　等倍稀释：用温度计确定稀释液与精液的温差，当温差小于1℃时，经行等倍稀释。将稀释液沿温度计缓缓倒入精液，并搅拌均匀。
　　镜检：静置半分钟，使精子适应后经行镜检，若精液质量没有较大变化可经行下一步。
　　按稀释份数稀释：根据稀释份数一次性将稀释液加入到精液中，搅拌、静置、镜检。
　　3、精液的标记：为了更好的区分不同种猪的精液，要将精液进行标记，如杜洛克用D、大约克用Y、大白用L等，也可以用公猪编号。
　　4、精液分装：
　　因为精液的分装，形势多样，单说精液瓶有100ml、80ml、30ml等等。从专业做人工授精的角度考虑，不建议用30ml的，也不推荐80ml。因为精液在输到母猪体内后会有一定比例的倒流，也就是说30ml的精液，单位容积精子密度要高，倒流后流失的有效精液数要多，所以不建议用小瓶的;还有一个就是稀释粉是为精子提供能量的，如果用30ml或者80ml来分装，那么相对100ml的保存时间要短。
　　还有就是，有的人工授精器械公司生产的精液瓶硬度要稍稍大一点，所以在输精过程中汇形成精液瓶负压，使精液流淌不顺，因此就产生了软包装的精液袋。但是如果使用精液袋分装精液的话需要额外的分装设备。
　　说到这里，再补充一点个人建议。如果精液在短时间内用不完需要保存的时候，不要分装保存，建议在集精袋中保存。这样的话精液袋的底面积要相对大于精液瓶，对于降低精子死亡率是有利的。
　　如果采用精液瓶保存精液，要注意将瓶内的空气尽量排干净在拧紧瓶盖。因为精液有三怕，一怕强烈震动、二怕阳光(紫外线)、三怕吸烟。

　　五、精液的保存
　　1、精液的保存方法：常用常温保存，但要注意，不能把稀释完的精液马上放入恒温箱，应该在室温下放置一段时间，让其慢慢降温到室温后再放到恒温箱进行保存。
　　2、精液的保存时间：保存时间除与精液本身有关系外，还与保存方法、稀释粉种类有关系。根据不同需要选择不同稀释粉，达到保存目的。
　　3、精液的翻动与镜检：精液在保存期间要经行翻动来保证活力，一般中效稀释粉稀释的精液每12小时翻动一次;每次精液使用之前必须经行镜检，保证配种的成功率。

　　猪人工授精是一个严谨的事情，当然有很多方面不会说的面面俱到和完全正确，大家如果有不同意见大家讨论。