1.1 FML 的制备

FML 由路德生物环保技术( 古蔺) 有限公司提供。其生产工艺如下:以茅台酒糟为培养基，接种高活性酵母菌种，采用三段式纯固态发酵工艺制备FML。第1 阶段优化培养条件促进酵母菌增殖;第2 阶段在厌氧条件下保证酵母的充分代谢，分泌代谢产物;第3 阶段在高温高湿的条件下促使酵母细胞破壁自溶水解。经测定，FML 中以干物质( 含量为92.97%) 为基础的养分水平如下:粗灰分9.28%、粗蛋白质23.96%、粗脂肪5.39%、粗纤维17.67%、酸性洗涤纤维38.0%、中性洗涤纤维47.28%、钙0.53%、磷0.55%和总能18.29 MJ /kg。

1.2 试验动物分组与饲养管理

动物试验在中国科学院亚热带农业生态研究所永安动物试验基地开展。试验选取平均体重为(39.95±2.15) kg 的健康杜×长×大三元杂交去势公猪48 头，根据体重随机分为4 组，每组12 个重复，每个重复1 头猪，饲养于HHIS－02 型全自动饲喂系统(河南某公司) 中。对照组饲喂基础饲粮，试验组用FML 分别替代5%、10%和15%的基础饲粮。基础饲粮的营养标准符合NＲC(2012) 推荐量，其组成及营养水平见表1。试验过程中，全自动饲喂系统实时记录每头试猪的日采食量和日增重等数据。饲喂、饮水、采光和免疫等饲养管理按养殖场规范操作。

1.3 样品采集与处理

分别于试猪平均体重达60、75 和110 kg 时，每组随机选取8 头试猪，清晨空腹称重，前腔静脉采血10 mL，肝素抗凝，3 000 r /min 离心10 min，分离血浆，分装于1.5 mL EP 管中，－20 ℃保存，用于血浆生化参数和抗氧化指标的测定。

1.4 血浆生化参数和抗氧化指标测定

血浆样品于4 ℃解冻后，按试剂盒( Beckman公司) 说明，采用CX4 型全自动生化分析仪( 美国Beckman 公司) 测定血浆中总蛋白( TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮( UN)、葡萄糖( GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇( CHO)、高密度脂蛋白－胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白－胆固醇( LDL-C) 含量以及乳酸脱氢酶( LDH)、α－淀粉酶( α-AMY)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 和丙氨酸氨基转移酶(ALT) 活性。按照试剂盒( 南京建成生物工程研究所) 说明，检测血浆中过氧化氢酶( CAT)、超氧化物歧化酶( SOD ) 和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px ) 活性以及谷胱甘肽( GSH) 和丙二醛(MDA) 的含量。

1.5 数据统计与分析

试验数据以“平均值±标准误”表示，数据用Excel 2010 初步整理后，利用SPSS 22.0 进行单因素方差分析( one-way ANOVA) ，并用Duncan 氏法对各组数据平均值进行多重比较。P＜0.05 表示差异显著，0.05≤P＜0.10 表示有变化趋势。

2.1 FML 对育肥猪血浆生化参数的影响

由表2 可知，在体重60 kg 时，与对照组相比，5%替代组血浆LDL-C 含量和α-AMY 活性显著升高( P ＜ 0.05) ，血浆ALT 活性显著降低( P ＜0.05) ; 10% 替代组血浆α-AMY 活性显著升高(P＜0.05) ，血浆GLU 含量和ALT 活性显著降低(P＜ 0.05) ，血浆HDL-C 含量呈降低趋势( P =0.059) ;15%替代组血浆TG 含量显著增加( P ＜0.05)。与5% 替代组相比，10% 替代组血浆LDL-C含量显著降低(P＜0.05) ，血浆CHO 含量呈降低趋势(P = 0.056) ;15%替代组血浆LDL-C 含量呈降低趋势(P = 0.066) ，血浆α-AMY 活性显著降低(P＜0.05)。与10%替代组相比，15%替代组血浆GLU 含量显著增加( P＜0.05) ，血浆α-AMY活性显著降低(P＜0.05)。在体重75 kg 时，与对照组相比，5%替代组血浆LDL-C 含量显著增加( P ＜ 0.05) ，血浆HDL-C含量显著降低(P＜0.05) ;10%替代组血浆LDL-C含量显著增加( P＜0.05) ，血浆AST 和LDH 活性显著降低( P ＜ 0.05 ) ; 15% 替代组血浆UN、HDL-C、GLU 含量以及α-AMY、AST 和LDH 活性显著降低( P＜ 0.05) ，血浆ALB 含量呈增加趋势(P = 0.077)。与5%替代组相比，10%替代组血浆UN 含量呈降低趋势( P = 0.064) ，血浆AST 和LDH 活性显著降低( P ＜ 0.05) ;15%替代组血浆UN、LDL-C 含量以及α-AMY、AST 和LDH 活性显著降低(P ＜ 0.05) ，血浆CHO 含量呈降低趋势(P = 0.052)。与10%替代组相比，15%替代组血浆UN 和CHO 含量和α-AMY 活性显著降低( P＜0.05)。

在体重110 kg 时，与对照组相比，5%替代组血浆UN 含量显著降低(P＜0.05) ，血浆α-AMY 活性显著升高( P ＜ 0.05) ，血浆ALT 活性显著降低(P＜0.05) ;10%替代组血浆UN 含量和ALT 活性均显著降低(P＜0.05) ，血浆AST 活性呈降低趋势(P = 0.054) ，血浆TP 含量显著增加( P ＜ 0.05) ;15%替代组血浆UN 含量以及AST 和ALT 活性显著降低(P＜0.05) ，血浆TP 和ALB 含量显著增加(P＜0.05)。与5%替代组相比，10%替代组血浆UN 含量和α-AMY 活性显著降低(P＜0.05) ，血浆TG 含量呈降低趋势(P = 0.057) ;15%替代组血浆UN 含量和α-AMY 活性显著降低(P＜0.05) ，血浆GLU(P = 0.083) 含量以及AST(P = 0.080) 和ALT(P = 0.094) 活性呈降低趋势，血浆TP 和ALB 含量显著增加(P＜0.05)。与10%替代组相比，15%替代组血浆ALB 含量呈增加趋势(P = 0.091)。

2.2 FML 对育肥猪血浆抗氧化指标的影响

由表3 可知，在体重60 kg 时，与对照组和5%替代组相比，15%替代组血浆GSH-Px 活性显著升高( P ＜ 0.05 ) ，血浆MDA 含量显著降低( P ＜0.05) ;15%替代组血浆GSH 含量显著高于对照组(P＜0.05)。在体重75 kg 时，与对照组相比，各替代组血浆CAT 活性均显著升高(P＜0.05) ;与对照组和5%替代组相比，10%替代组和15%替代组血浆GSH-Px 活性显著升高( P＜ 0.05) ，15%替代组血浆SOD 活性显著高于对照组( P＜0.05)。在体重110 kg 时，与对照组相比，15% 替代组血浆MDA 含量呈降低趋势(P = 0.092)。

血浆TG、CHO、HDL-C 和LDL-C 含量是衡量机体脂质代谢强弱的主要指标。血浆TG 含量降低提示脂肪沉积能力减弱;血浆CHO 含量可反映机体对脂类的吸收代谢能力;LDL-C 将肝脏合成的CHO 转运到肝外组织，而HDL-C 则把CHO 运回肝脏代谢转化为其他物质，从而维持机体内CHO 含量的稳定。本试验中，用FML 部分替代基础饲粮尤其是15%替代可显著增加60 kg 育肥猪血浆TG 含量，5%替代可显著增加60 kg 育肥猪血浆LDL-C 含量;5%和15%替代均可显著降低75 kg 育肥猪血浆HDL-C 含量，5%和10%替代均可显著增加75 kg 育肥猪血浆LDL-C 含量; 与10%替代相比，15%替代显著降低了75 kg 育肥猪血浆CHO 含量。这提示FML 可改变育肥猪体脂代谢，且作用效果与添加量和添加阶段有关。但上述血浆脂质代谢相关指标的改变对动物机体是不利的，肌肉中上述脂质代谢相关指标如何发生变化尚需要进一步研究。

血浆GLU 含量以及α-AMY 和LDH 活性是反映机体糖代谢的相关指标。血浆GLU 含量受胰岛素和胰高血糖素的调节，与动物采食量、机体营养状况和应激水平也呈强相关。血浆α-AMY活性是反映机体消化吸收状况的一个重要指标，提高血浆α-AMY 活性可提高机体的消化吸收能力和抗病力。LDH 是与组织能量代谢密切相关的酶，动物采食量降低、肠道或肌肉供能不足、细胞萎缩或凋亡，均可引起血浆LDH 活性的升高。本试验中，用FML 替代10%和15%基础饲粮分别显著降低了60 和75 kg 育肥猪血浆GLU 含量;5%和10%替代基础饲粮显著提高了60 kg 育肥猪血浆α-AMY 活性，15%替代显著降低了75 kg 育肥猪血浆α-AMY 活性，5%替代显著提高了110 kg 育肥猪血浆α-AMY 活性。此外，与5%替代相比，10%和15%替代显著降低了110 kg育肥猪血浆α-AMY 活性;10%和15%替代显著降低了75 kg 育肥猪血浆LDH 活性。这提示饲粮添加FML 能提高育肥猪的消化吸收能力，促进机体的能量代谢。这可能是FML 中含有的各种活性成分促进了育肥猪肠道益生菌的增殖，进而改善了饲粮中的能量利用效率。而笔者前期研究用FML 替代部分基础饲粮并不影响育肥猪的生长性能，且添加5%的FML 可显著增加平均日增重，显著降低料重比( 数据未发表)。

AST 主要存在肝细胞胞浆和线粒体中，其活性的高低直接与肝细胞或线粒体的损伤程度相关。ALT 是机体内重要的转氨酶，在氨基酸代谢以及蛋白质、脂肪和糖的代谢转化过程中发挥着重要作用。本试验中，用FML 部分替代基础饲粮尤其是15%替代显著降低了75 和110 kg 育肥猪血浆AST 活性，10%替代显著降低了75 kg 育肥猪血浆AST 活性;5%和10%替代显著降低了60 和100 kg 育肥猪血浆ALT 活性，15%替代显著降低了75 和100 kg 育肥猪血浆ALT 活性，这与前述FML 可增加机体蛋白质合成和改善机体能量代谢这一结果相符。这提示FML 替代部分基础饲粮可对育肥猪肝功能产生有利影响，且其作用效果与替代量有关，这可能与发酵酒糟中含有的多种功能性多肽和未知生长因子有关。

动物机体中存在的清除氧自由基的酶系统主要包括SOD、GSH-Px 和CAT，其活性高低反映了机体抗氧化能力的强弱;GSH 可清除自由基、去除氢和脂质过氧化物，防止生物分子的氧化;MDA 是自由基作用于脂质发生过氧化反应的终产物，其含量增加与自由基生成异常或机体抗氧化能力降低有关，因此其含量高低能直接反映细胞膜被氧化的程度。本试验中，用FML 替代15%基础饲粮可显著提高75 kg 育肥猪血浆CAT、SOD 和GSH-Px 活性，显著提高60 kg 育肥猪血浆GSH-Px 活性和GSH 含量，并显著降低60 kg 育肥猪血浆MDA 含量，表明FML 可增强机体抗氧化功能并减少氧化损伤。这可能与其中含有GSH、维生素B₂、维生素C、维生素E、硒和锌等多种生物活性物质有关。肌肉中的脂质氧化会影响肉品质，增强育肥猪机体抗氧化能力有助于减少肌肉中的脂质氧化和细胞膜的损伤，这可能是饲粮添加FML 改善肉品质的机制之一。