摘要:本试验旨在研究添加不同比例益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态、血清T淋巴细胞业群及肠道菌群的影响。选用14日龄健康黄羽肉鸡320只.随机分成4组,每组4个重复,每个重复20只鸡。I组为空白对照组。II .I.V组分别添加3% .6%和9%发酵棉粕,研究不同添加址对肉鸡生长前期(14~28 I龄)、中期(29~45 H龄)、后期(46~65口龄)各阶段小肠黏膜形态.中、后期血清T淋巴细胞亚群及后期肠道菌群的影响。研究结果显示:①与I组相比.组黄羽肉鸡前、中、后期的十二指肠绒毛高度极显著提高31. 90%、25. 17%.49. 41%(P<0.01).隐窝深度极显著降低9. 42%、11.31%、10.83%(P<0.01),V/C极显著提高45. 65%.41.19%、67. 84%(P<0.01);空肠绒毛高度极显著提高28. 72% .28. 38% .27.61% .(P<0.01),隐窝深度显著或极显著下降6. 65%(P<0.05).6. 18%(P<0.01).7.37%(P<0.01).V/C极显著提高37.84%、36. 69%、37. 82%(P<0.01):回肠绒毛高度极显著提高76. 64%,40.36% .67. 20%(P<0.01)，隐深度显著降低4. 09%、6.07%.6.02%(P<0.05).V/C极显著提高83. 79%、49. 27%.78.26% (P<0. 01)。②中、后期组黄羽肉鸡CD4+ /CD8~显著提高42.86%,34.95%(P<0.05)。③随着发酵棉粕添加量的增多.黄羽肉鸡的十二:指肠.空肠、回肠中乳酸菌的数量逐渐增多.且差异越来越明显.除1组十二指肠和空肠段外,其余各组的各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。大肠杆菌和沙门氏菌的数量逐渐减少.H差异越米越明显.除口组十二指肠段外,其余各组各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。综上所述.6%发酵棉粕组在提高十二指肠、空肠、回肠绒毛高度.V/C,降低其隐窝深度方面都优于3% .9%发酵棉粕组,而9%发酵棉柏组在提高CD4“/CD8”、肠道乳酸菌数量和降低大肠杆菌和沙门氏菌数量方面优于3%.6%发酵棉粕组。

关键词:黄羽肉鸡;小肠黏膜形态;血清T淋巴细胞亚群:肠道菌群

随着畜牧业的迅猛发展,人畜争粮矛盾日益突出，蛋白饲料资源出现了严重的短缺,棉籽饼粕富含蛋白质,是很好的动物饲料蛋白质源,因而备受关注。但因游离棉酚含量高，使其作为饲料使用受到了极大的限制,采用物理.化学或生物学方法对棉粕进行处理可降解棉酚，尤以对棉粕进行发酵处理最为高效。发酵棉粕不仅可替代部分鱼粉、豆粕,降低饲料生产成本,且发酵棉粕中的益生菌既能在数量又能在种类上.补充动物消化道内缺少的正常微生物,调整和维持消化道微生态平衡，促进乳酸菌、双歧杆菌等有益菌的增殖.抑制大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的生长,提高机体免疫力,而且可以与有益微生物产生的各种消化酶协同作用.降解饲料中的抗营养因子,提高饲料利用率,进而提高动物的免疫性能.促进消化道微生态平衡。目前关于发酵棉粕的研究多集中在脱毒效果及饲料营养成分变化方面，在动物生产中的应用则多集中在生产性能方面，而在动物肠道微形态.血清T淋巴细胞亚群和肠道菌群方面的研究基本没有。本试验通过在日粮中添加不同比例益生菌发酵棉粕研究其对黄羽肉鸡小肠黏膜形态.血清T淋巴细胞亚群及肠道菌群的影响。

1、材料与方法

1.1试验动物及分组选择体质健康、体重相近的14日龄商品代黄羽肉鸡320只。采用单因素多水平试验设计,将试验动物随机分成4组,每组分4个重复,每个重复20只。I组为空白对照组，II .I、IN组分别添加3%、6%和9%益生菌发酵棉粕。各饲喂时期分别为:前期(14~28日龄)、中期(29 ~45日龄)、后期(46~65日龄)。试验采用代谢笼分栏饲养,自由采食，自由饮水,并严格按照饲养管理制度进行饲养管理。试验在试验鸡场进行，试验鸡场提供。

1.2益生菌发酵棉粕试验用益生菌发酵棉粕,由酵母菌、芽孢杆菌和乳酸菌混合益生菌发酵棉粕而成。

1.3试验日粮组成及营养水平黄州肉鸡试验日粮由玉米、大豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米蛋白质粉等原料,参照1994年NRC的《家禽营养需要量》由按要求配制。日粮的配制选用常规的饲料原料.各饲喂时期的日粮组成及营养水平见表1。

1.4试剂与仪器肠道菌计数琼脂.MRS琼脂、SS琼脂:鸡淋巴细胞分层液、小鼠抗一鸡CD3-FITC(规格0.5 mg)、小鼠抗一鸡CD4 PE(规格0. 1 mg)、小鼠抗-鸡CD8a-PE(规格0.1 mg)均;1%伊红、苏木精染色液为自配。PAS型流式细胞仪;LeicaRM2235旋转切片机、KD-T电脑生物组织烤摊片机。

1.5 样品采集与分析测定

1.5.1样品采集①血样采集:分别于45和65日龄10: 00从每个重复中随机选取1只体重接近平均体重的试验鸡,用加有肝素抗凝剂的采血管心脏采全血2 mL,送至石河子大学第二附属医院,进行血清T细胞亚型检测(所有血样必须在8 h内检测完),采血前空腹10 h,停料不停水。②肠段采集: 分别于28.45和65日龄10:00从每组随机选取4只体重接近平均体重的试验鸡，静脉放血.解剖,清理出肠段.切取2~3cm十二指肠、空肠、回肠,尽量切取各肠的中间段，每段肠两份。一份用生理盐水清洁切口、污物.结扎.用于肠道菌群培养;另一份用生理盐水尽量清理干净肠段污物.编号,置于10%甲醛溶液中保存,用于肠道组织切片的制作。.

1.5.2 分析测定

1.5.2.1 石蜡切片制作与显微测量 先脱水、透明,接着进行透蜡、包埋和修块,然后切片、贴片、展片与烤片.随后经过脱蜡、染色和封片.最后观察测量,并用Leica专用万能显微镜数码拍照,光镜下用Photoshop软件处理,测定绒毛高度(VH)、隐窝深度(CD)。每个样品观察6个非连续性5~10 μm的纵切片,每张纵切片测定5~10个绒毛高度和隐窝深度。绒毛高度以肠腺开口至绒毛顶端的垂直高度为准，隐窝深度以黏膜肌层至肠腺开口处的垂直高度为准。

1.5.2.2T细胞亚型检测①先取2mL.淋巴细胞分离液于试管中,再取2 mI. 全血沿管壁慢慢加

于淋巴细胞分离液上,3000 r/min,离心15 min.②. 用吸管吸取白细胞层(淋巴细胞层)，加PBS液混匀,800 r/min,离心10 min,连续操作2次。③将细. 胞配成(1~2)X 10"个/mL.按说明进行CD3-FITC/CD4-PE、CD3-FITC/ CD8a-PE染色，上机，进行流式细胞仪检测，计数2X10'个。检测CD3*T细胞占圈门细胞的百分含量和CD4"、CD8*占CD3'T细胞的百分含量。④用CEELLQUEST软件分析和处理流式细胞仪上获取的数据。

1.5.2.3 菌群培养在超净工作台中，立即取肠道内容物1 g,放人无菌试管中,加入无菌生理盐水9 mL,在磁力震荡器震荡3~5 min,此液为10~稀释液,再依次进行倍比稀释,分别将不同肠段适当的3个稀释度的100μl.稀释液涂于各自相应鉴别培养基上培养,每个稀释度设3个重复,待培养完毕后，根据菌群细胞形态、大小,选择菌落数在5~150个之间的进行菌落计数。结果用每克肠道内容物中细菌个数的对数(log CFU/g)表示。

1.6 数据处理试验数据采用Excel软件整理，SPSS 16.0统计软件()ne- Way ANOVA进行方差分析,LSD法进行组间差异显著性检验,试验数据以平均值士标准差表示。

2、结果与分析

2.1 益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态的影响.

2.1.1益生菌发酵棉粕对前期黄羽 肉鸡小肠黏膜形态的影响由表2可知，就十二指肠绒毛高度而言,I1、IV组较I组分别极显著提高9. 12%、31. 90%、15.92%(P<0.01)。II 、I、IV组十二指肠隐窝深度分别比I组极显著降低4. 18%、9. 42%.3. 56%(P<0.01)。IIII、IN组十二指肠绒毛高度与隐窝深度(V/C)的比值较I组分别极显. 著提高13.88.45.65%、20.24%(P<0.01)。与I组相比，0、IV组空肠绒毛高度分别极显著提高28.72%、15.13%(P

2.1.2益生菌发酵棉粕对中期黄羽肉鸡小肠黏膜形态的影响

由表3可知,就十二指肠绒毛高度而言，III、IV组较I组分别极显著提高11. 22%、25. 17%、24.54%(P<0.01);与I组相比，I、IV组十二指肠隐窝深度分别极显著降低6. 31%、11. 31% .5.57%(P<0.01);十二指肠绒毛高度与隐窝深度(V/C)的比值分别极显著提高18. 76%、41. 19% .31.81%(P<0.01)。较I组而言，1、II、NV组空肠绒毛高度分别极显著提高9. 36%、28. 38%、16. 88%(P<0.01);I1、V组空肠隐窝深

度分别降低2. 94% .2. 35%(P>0.05),叫组则极显著降低6.18%(P<0.01);Il、I、IV组空肠绒毛高20.47%、40. 36% .37. 96%(P<0.01),回肠隐窝深度分别显著降低5.41%、6.07%、4. 80% (P<0.05).回肠绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C)分别极显著提高27.67%、49.27% .44.90%(P<0.01)。

2. 1.3 益生菌发酵棉粕对后期黄羽肉鸡小肠黏膜形态的影响

由表 4↓可知，就十二指肠绒毛高度而言.II、IV组较1组分别极显著提高30. 18%、49.41% ,36.73%(P<0.01);与1组相比，I1、IV组十二指肠隐窝深度分别极显著降低5. 78%、10. 83%、5.19%(P<0.01).十二指肠绒毛高度与隐窝深度(V/C)的比值分别极显著提高38. 01%、67. 84%.44. 15%(P<0.01)。较I组而言，川、I组空肠绒毛高度分别极显著提高27.61%、13. 39 %(P<0.01), I组显著提高5. 23%(P

2.2益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡血清CD4~/CD8’比例的影响

由表5可知，中期IN组的CD4' /CD8"较I组提高42. 86%(P<0.05),高于其他各组.说明IN组的健康状况优于其他各组.抗应激能力最强。后期I组的CD4' /CD8'与I组相比提高34.95%(P<0.05),高于其他各组，说明N组的健康状况最佳，免疫能力最好。同一时期,随着益. 生菌发酵棉粕添加量的增多,CD4~ /CD8'逐渐升高，说明黄羽肉鸡的抗应激能力在逐渐增强，且各试验组后期CD4~ /CD8"均较前期有所提高,表明黄羽肉鸡后期的抗应激能力在增强,健康状况在提高。

2.3 益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡肠道菌群的影响

由表6可知，随着益生菌发酵棉粕添加量的增多，黄羽肉鸡的十二指肠、空肠、回肠中的乳酸菌的数量逐渐增多,试验组较对照组差异越来越明显,除3%益生菌发酵棉粕组十二指肠和空肠段的乳酸菌与对照组相比差异不显著，其余齐组的各肠段较对照组差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。随着益生菌发酵棉粕添加量的增多.黄羽肉鸡的十二指肠. 空肠、回肠中的大肠杆菌和沙门氏菌的数量逐渐减少,试验组较对照组差异越来越明显.除3%益生菌发酵棉柏组十二指肠段的大肠杆菌与对照组相比差异不显著,其余各组的各肠段较对照组差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。

3、讨论

3.1 益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态的影响

小肠是动物消化吸收的主要场所.肠道黏膜结构与小肠消化吸收功能常切相关。小肠绒毛是小肠的最主要黏膜结构。是动物消化和吸收营养物质的特有结构,小肠的长度、宽度及隐窝深度直接影响小肠的吸收面积。绒毛高度与绒毛上皮细胞数量呈显著正相关，只有成熟的绒毛细胞才具有吸收养分的功能。因此,绒毛增高时.成熟细胞增多,养分吸收能力增强。隐窝深度反映了细胞生成率,隐窝变浅，表明细胞成熟率上升,分泌功能增强。V/C综合反映小肠绒毛吸收功能，当V/C减小时，说明绒毛对营养物质的吸收能力减弱。11常伴随腹泻的发生。当V/C增大时，说明绒毛对营养物质的吸收能力增强,消化吸收功能增强，腹泻率也下降。指出,小肠是消化道中营养物质吸收和运输的最主要部位，小肠绒毛的主要功能是吸收,绒毛上皮细胞是消化吸收的功能细胞,肠腺的主要功能是分泌，对营养物质的吸收非常有利。因此.良好的小肠黏膜结构是养分消化吸收和动物正常生长的生理学基础。绒毛高度与隐窝深度反映了肠道的功能状态.隐窝深度的增加表明绒毛上皮成熟细胞减少。试验结果表明,日粮中添加益生菌发酵棉粕均可显著或极显著提高十二指肠.空肠、回肠绒毛高度，显著或极显著降低十二指肠、空肠、回肠隐窝深度,显著或极显著提高其绒毛高度与隐窝深度的比值。说明益生菌发酵棉粕可以改善黄羽肉鸡健康状况.增强免疫能力，这与研究结果相一致。

3.2 益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡血清T淋巴细胞CD4' /CD8'的影响

T 淋巴细胞CD4' .CD8'亚群百分含量或浓度与动物机体的免疫防御密切相关。CD4- /CD8'比例高则机体自身免疫功能相对强，低则相反(刘小刚等.2010)。目前,对淋巴细胞业群的研究多集中在某些中药有效成分或寡糖成分: 对CD4'和CD8" T淋巴细胞的影响,但效果多不一致。CD4'是T细胞辅助/诱导细胞的标志,具有使辅助T细胞转变为效应T细胞及B细胞生产抗体和|i噬细胞活化等功能;CD8 '是抑制性T细胞的标志，可以抑制免疫细胞的功能.维持机体内环境的稳定性。CD4' 和CD8*细胞都是机体免疫调节的枢纽,是反映机体细胞免疫的非特异性免疫学指标。它们的稳定是维持机体正常免疫功能所必需的,一般情况下，以CD4'和CD4 : /CD8'比值的高低.作为衡量机体免疫状态高低的依据。在黄羽肉鸡日粮中添加补益类中草药提取物可显著提高28和56日. 龄黄羽肉鸡CD4"/CD8'比值.使用中药敌克素也可显著提高CD4' /CD8*比值。给断奶仔猪加谷氨酰胺二肽,证实谷氨酰胺二肽可以提高仔猪断奶第10天的CD4'T细胞百分含量,降低CD8* T细胞百分含量,并提高断奶第10和21天的CD4 "/CD8'。给不同免疫状态雏鸡添加米糠多糖,验证了米糠多糖能够提高雏鸡CD4+ T淋巴细胞比例,但对CD8* T淋巴细胞作用不明显。给球虫感染鸡注射牛膝皂甘,结果发现牛膝皂甘能够促进球虫免疫鸡的免疫机能状态。本试验结果发现.9%益生菌发酵棉粕可显著提高CD4 /CD8 ”.由此可见.益生菌发酵棉粕能够提高机体的正向免疫调节.从而起到增强黄羽肉鸡的细胞免疫水平。机制可能是由于添加益生菌发酵棉粕饲料在发酵过程中产生的小分子物质(如寡糖类成分)或小肽(如谷氨酰胺二肽)的免疫调节作用.具体原因还有待进-步的深入研究。

3.3益生菌发酵棉粕对黄羽肉 鸡肠道菌群的影响

动物刚出生时.肠道内基本上.无菌.此时,若能及时提供优良菌群可以抢先占领动物肠道.对动物以后的健康起巨大作用。在动物生长后期.肠道功能进一步完善.此时.在H粮中若再添加微生:物制剂可以起到补充、完善肠道有益菌群平衡、保证健康等作用。

芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌是保证动物消化道健康的重要菌群,乳酸菌通过产乳酸降低肠道pH. 有效抑制致病大肠杆菌、沙门氏菌的生长.芽孢杆菌酵母菌通过有氧呼吸,大量消耗肠道中有限的游离氧,造成肠道中游离氧更加稀薄.此举严重抑制了致病大肠杆菌、沙门氏菌的生长与繁殖,同时也促进了乳酸菌的生长.维持了肠道内的微生态平衡.这也. 所认同,并与其试验结果-致，在肉鹅日粮中添加纤维素酶显著提. 高乳酸杆菌数量.减少官肠内容物中的大肠杆菌的数量的报道一致。报道寡糖不仅有益

菌生长抑制有害菌繁殖.还可促进各种营养物质的吸收利用等。大肠杆菌本是动物肠道的正常菌群，是动物体不可或缺的细菌,但某些能致病的菌株往往引起各种疾病,给养殖业带来重大的经济损失。在肉仔鸡日粮中添加0. 4%益生索，显著提高了乳酸菌的数量，表明黄羽肉鸡日I粮中加人益生素有助于乳酸菌的生长繁殖,这些均与本试验研究结果一致。在本试验中9%益生菌发酵棉粕可极显著提高十二指肠、空肠、回肠的乳酸菌的数量.极显著降低十二指肠、空肠、回肠的大肠杆菌和沙门氏菌的数量。可能是经过微生物发酵.产生的一些中间产物(如肽类、氨基酸、低聚糖等)促进了有益微生物混合菌的生长,许多试验结果表明.大多数低聚糖可作为肠道有益菌(如双歧杆菌、乳酸菌等的碳源),梭状芽孢杆菌、真杆菌.肠杆菌或大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌却不能利用或利用率极低。

研究结果表明.在育肥猪H粮中添加芽孢杆菌，肠道中芽孢杆菌、双歧杆菌、乳酸菌数量显著增加，而大肠杆菌的数量显著减少。指出.合生素可以增加肉鸡肠道中乳酸菌数时,但显著抑制大肠杆菌的生长繁殖。以上:研究结果表明,益生菌发酵棉粕中的有益微生物能促进肠道自身或外源有益菌在肠道内生长与定植.抑制有害菌生长.从而使动物建立起iE常肠道微生物区系。促进动物生长，这与报道结果相一致。

4、结论.

益生菌发酵棉粕可显著提高十二指肠、空肠.问肠绒毛高度.隐窝深度则不同程度的降低.各肠段绒毛高度/隐窝深度值均显著或极显著提高,显著提高各试验组黄羽肉鸡免疫能力,以添加6%益生菌发酵棉粕试验效果最好。益生菌发酵棉粕可显著提高十二指肠、空肠、问肠的乳酸菌的数量,显著降低大肠杆菌和沙门氏菌的数量.添加9%益生菌发酵棉粕效果最为明显。

实战操作技术——棉菜籽饼脱毒变身优质饲料替代豆粕操作新技术

当前豆粕价格很高有些地方货源紧缺，而棉菜籽饼（棉籽粕、菜籽粕）价格相对便宜，棉菜籽饼是棉子、油菜籽榨油后剩下的饼状残渣，蛋白质含量较高，含有各种氨基酸成分。但由于棉菜籽饼中含有植酸、芥子碱等物质，这些物质含有一定的毒性，还会影响动物的消化吸收，不能大量使用，因此不建议直接饲喂给动物！

现在通过微生物饲料发酵剂的除毒脱毒技术，可以成功将菜籽饼变为优质添加饲料，直接按照1公斤发酵的棉菜籽饼（发酵前的重量）代替约0.85公斤豆粕进行使用。饲料发酵剂中的有益微生物，在发酵过程中分泌的代谢产物，可将棉菜籽饼中的毒性物质等有效分解。

豆粕、菜粕、棉粕成分对比

1.豆粕是一种高蛋白原料，无需脱毒即可用作饲料。其中蛋白质含量为40%-48%，赖氨酸含量为2.5%-3.0%，色氨酸含量为0.6%-0.7%，蛋氨酸含量为0.5%-0.7%。2020年11月12日报价每吨在3500元左右。

2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之间，特点是蛋氨酸含量高（仅次于芝麻饼、粕），赖氨酸含量亦高。而精氨酸含量低，是饼、粕饲料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低（淀粉含量低、菜籽壳难以消化利用）。矿物质中，钙和磷的含量均高，硒和锰的含量亦高。特别是硒的含量是常用植物饲料中最高的。2020年11月12日报价每吨在2900元左右。

3.棉粕蛋白质含量一般为44.32%，仅次于豆粕的蛋白质含量48%，而高于菜籽粕的蛋白质含量36.04%。精氨酸含量高达3.6%-3.8%，而赖氨酸含量仅有1.3%-l.5%，只有豆粕的一半。2020年11月12日报价每吨在3000元左右。

是否需要脱毒处理

1.豆粕无需经过脱毒即可用作饲料。而且豆粕中富含蛋白质和多种氨基酸，在不需要额外加入动物性蛋白的情况下，仅豆粕中含有的蛋白质和氨基酸足以平衡家禽和猪的食谱，促进它们的营养吸收。只有当其他粕类单位蛋白成本远低于豆粕时，豆粕才有可能被替代。

2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、单宁、皂角苷等不良成分，其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身无毒，但在一定温度和水分条件下，经过菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而产生异硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈类等有害物质。这些物质可引起甲状腺肿大，从而造成动物生长速度下降，繁殖力减退。单宁则妨碍蛋白质的消化，降低适口性。而芥酸阻挠脂肪代谢，造成心脏脂肪蓄积及生长受到抑制。。使用前需进行一定的脱毒处理，并且使用时要加以限制，具体喂量应根据菜粕中有害成分含量而定。经过脱毒处理的菜籽粕喂量可以加大，而“双低”油菜籽生产的菜粕喂量要受限制。同时，应结合菜粕的氨基酸组成特点，适当搭配其它饼粕。

3.棉籽中含有对动物有害的棉酚及环丙烯脂肪酸，尤其是棉酚的危害很大。在制油过程中，由于蒸炒，压榨等热作用，大部分棉酚与蛋白质、氨基酸结合而变成结合棉酚，结合棉酚在动物消化道内不被动物吸收，故毒性很小。另一部分棉酚则以游离形式存在于饼、粕及油品中，这部分游离棉酚对动物毒性较大，尤其单胃动物过量摄取或摄取时间较长，可导致生长迟缓、繁殖性能及生产性能下降，甚至导致死亡。幼小动物对棉酚的耐受能力更低。由于棉籽饼、粕中游离棉酚对动物有害，因此，在使用棉饼、粕时，要根据饲喂对象及饼粕中游离棉酚的含量加以限量。反刍家畜在有优质粗料及多汁青料的情况下，棉籽饼、粕的用量不受限制，不会造成中毒。对单胃动物要限制喂量，最好使用经过脱毒处理的棉籽饼粕。同时，使用棉籽饼、粕配制饲粮要注意氨基酸平衡，尤其是棉籽饼、粕的赖氨酸含量低，且利用率差，应注意添加赖氨酸。

发酵操作技术

发酵棉菜籽饼其实也是一个脱毒技术，具体操作如下：

1.仔细检查棉菜籽饼，剔除棉菜籽饼中严重变质发霉的部分，轻度发霉的原料可以忽略，因为微生物发酵能够脱霉。

2.将棉菜籽饼粉碎并添加适量的玉米粉淀粉类的能量饲料等，调节饲料营养比例。

3.每吨棉菜籽饼加入2公斤食盐、玉米粉（其它淀粉、面粉次粉等也可以，或者粉碎的生红薯300公斤也可以）100公斤、“99多功能饲料发酵剂”1包（500g/包，市场售价约25元，以高浓度乳酸菌、酵母菌、复合酶制剂的专业发酵剂）。

4.在混合物料中添加适量水分，使混合物料含水量保持在55%左右，以“手抓一把并紧握，无水滴落，松手后轻触即散”为宜，一般上述配方中需要加入清水约500-600公斤。

5.发酵方式根据实际环境条件各异，在桶、缸、塑料袋等容器中发酵均可。

6.发酵时要尽可能排尽空气进行密封发酵。如果使用的发酵容器有密封不严实的隐患，要在一开始就在其外层包裹一层塑料袋并扎紧。发酵过程中不能启封。

7.发酵时间受环境温度影响，通常夏季发酵2-3天，冬季发酵5-7天即可完成。发酵完成后，有较为强烈的酸香味，ph值在3-4。

规模运用混合发酵现场

塑料缸、饲料袋（有内膜）均可做发酵饲料

采用池子发酵

发酵完成的棉菜粕饲喂动物技术

需要注意的是，发酵后的饲料酸度较低，不可以取代禽畜全部日粮。其他类发酵饲料同理。饲喂时根据不同情况，将发酵饲料按照一定比例添加到日粮中，发酵完成的棉菜粕为湿料，具体使用量每大概1.5-2公斤发酵棉菜粕（湿料）代替动物日粮配方中1公斤豆粕的使用量进行代替使用，与其它饲料混合后直接饲喂，由于棉菜籽粕蛋白较高，最高使用量不要超过禽畜日粮饲喂量的40%（湿料重量）。如果发现发酵饲料过酸适口性变差，可在饲喂前在阳光下晒1-2小时，或添加适量的碳酸氢钠（小苏打）即可改善。

发酵过程中与发酵后使用过程中，发酵的容器要一直保持密封状态，可以长时间保存（一年左右）。

当前养殖业成本高居不下，而饲料成本是其中最高的，利用廉价原料发酵饲料（包括一些轻度发霉的粕类低价收回）是极佳解决办法。通过微生物饲料发酵剂的发酵作用，可以将轻度霉变饲料变成优质饲料，将不易消化的物质分解为可被畜禽吸收的小分子糖类、氨基酸等。同时发酵饲料中富含有益微生物、酶制剂、酸化剂等，可调节畜禽肠胃微生态环境并进一步提高饲料利用率。发酵饲料气味清香，提高了饲料的适口性，加上发酵饲料中有大约4℃的酒度，能够促进动物新陈代谢促进健康抵御疾病，是当前养殖业发展中重要的一环。

本技术也可以同样发酵菜籽粕（饼）、棕榈粕等，方法同上。

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2020年已全面禁抗，我们之前经常在饲料中添加的抗生素进行促生长行为将是违法，否则面临巨额罚单。如何既能够促进动物生长又能够形成无抗养殖呢？其实中草药在促进畜禽养殖健康和生长、改善肉蛋奶品质大有可为，特别是将中草药发酵后效果提升4-28倍等好处，这个实施方案比你想象中效果更好，运用的没有不被效果折服的，值得尝试验证

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