蛋白饲料资源紧缺和价格的不断飙升，已经成为我国畜牧业发展的主要瓶颈之一。棉粕因为资源丰富，蛋白含量高且价格较豆粕、鱼粉等蛋白原料低而备受青睐，但其中游离棉酚的存在使其利用受到限制。棉粕通过微生物发酵不但可以有效降解其中的游离棉酚含量，还可增加其营养价值，具有改善肉鸡生长性能、屠宰性能、增强免疫力等作用。然而，发酵棉粕对于肉鸡肌肉脂肪酸组成的影响未见报道。脂肪酸的含量是判断肌肉品质的重要指标之一。硬脂酸(C18：0)、软脂酸(C16：0)、油酸(C18：1)、亚油酸(C18：2)是禽肉中主要的脂肪酸，其含量约占总脂肪酸的85％。95％。因此，本研究就酵母菌发酵棉粕对黄羽肉鸡肌肉中这4种主要脂肪酸组成进行分析，为棉粕的深度利用和发酵棉粕生物饲料作为功能性蛋白饲料的开发提供依据。

1材料与方法

1．1试验材料

发酵底物：棉粕、玉米、麸皮。

发酵菌种：热带假丝酵母ZD一3、酿酒酵母均由浙江大学饲料所选育提供。

培养基：酵母膏胨葡萄糖(琼脂)培养基，酵母膏：蛋白胨：葡萄糖=1：2：2，葡萄糖溶液用无菌滤器过滤后单独加入，固体培养基琼脂添加量为2％。

1．2发酵棉粕的制备

发酵棉粕底物按照棉粕70％、玉米20％、麸皮10％混合均匀，底物与水为1：0.8，发酵棉粕制备参考文献，未发酵底物加入等量的培养基，其余过程与发酵底物进行同样的处理。

1．3试验设计

将300只1 13龄黄羽肉鸡饲喂商品饲料育雏14d后，再饲喂对照组日粮预饲7d，以适应试验粉状饲料。然后从中选取180只健康的体重相近的肉鸡，随机分为3组，即对照组(CG组)、单酵母发酵棉粕组(CT组)，复合酵母发酵棉粕组(cr组)，每组6个重复，每个重复10只鸡(公母各半)。其中CG组、CT组和CF组分别加入未发酵棉粕底物、热带假丝酵母发酵棉粕和热带假丝酵母与酿酒酵母复合发酵棉粕，添加量均为6％。试验期42 d，分21～42日龄和43～64日龄两个阶段，饲养管理按常规进行，各组日粮组成及营养水平见表1。

1．4样品采集及预处理

在42和“日龄，每个重复随机选取接近平均体重的2只鸡，每组共12只，空腹12 h后，颈动脉放血致死。从每只鸡的相同部位分离胸肌和腿肌约20 g，一80℃保存。分析前将样品室温解冻、剪碎，在真空冷冻干燥机中干燥24 h后迅速粉碎，用于肌肉脂肪酸分析。

1．5肌肉脂肪酸分析

取100 mg冷冻干燥样品，加入l mL混合提取溶剂(甲醇：氯仿：水=8：4：3，体积比)，冰浴匀浆5 min、振荡5 min、超声10 min，然后在4℃以10 000 r／min离心5 min，取上清液。上清液中加入500μL氯仿和500 μL水，振荡5 min，静置分层后取下层分离液，用温和氮气吹干。加入0.5 mol／L的氢氧化钾甲醇溶液500 μL，漩涡混合2 min，60 ℃水浴甲酯化20min，冰水冷却。再加入正己烷500μL，加入饱和氯化钠溶液500μL，振荡萃取3min，4℃以10 000 r／min离心5 min后取上清液，用气相色谱仪(6890N型，安捷伦公司)进行分析。

气相色谱条件：FID检测器，色谱柱DD—WAX石英毛细管柱(30rex0.25 minX0.25μm)。进样口温度250℃，进样量lμL，分流比为10:1，载气流量1．5 mL／min。采用程序升温：50℃保持2 min，10 ℃／min到170 ℃，保持10 min；4 ℃／min到180℃，保持10 min；2℃／min到220℃，保持10 min。检测器温度300℃，氢气流量40 mL／min，空气流量400 mL／min，尾吹流量45 mL／min。

通过与标准样品的保留时间来确定脂肪酸，结果用单个脂肪酸的峰面积占总甲酯化脂肪酸峰面积的百分比表示。

1．6数据处理与分析

饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的含量由脂肪酸的组成计算所得。试验数据采用SPSS 16.0软件One—way ANOVA进行分析，用LSD法进行多重比较。结果以(平均值±标准差)表示，显著性水平为P<0.05。

2结果与分析

2．1发酵棉粕对2l一42日龄肉鸡胸肌主要脂肪酸组成的影响

发酵棉粕对21～42日龄肉鸡胸肌主要脂肪酸组成的影响见表2。由表2可知，较CG组而言，CF组显著降低油酸的相对含量(P<0.05)，而各试验组中亚油酸的含量显著增jJI(P<0.05)。试验组间及试验组与对照组软脂酸、硬脂酸、饱和脂肪酸及不饱和脂肪酸的含量、不饱和脂肪酸／饱和脂肪酸的比值均没有显著性的变化(P>0．05)。

2．2发酵棉粕对21～42日龄肉鸡腿肌主要脂肪酸组成的影响

发酵棉粕对21。42日龄肉鸡腿肌主要脂肪酸组成的影响见表3。由表3可知，与CG组相比，试验组中软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、饱和脂肪酸、不饱和脂肪的含量及不饱和脂肪酸，饱和脂肪酸的比值均未发生显著变化，而且试验组间脂肪酸组成也没有显著性的改变(P>0.05)。

2．3发酵棉粕对43～64日龄肉鸡胸肌主要脂肪酸组成的影响

发酵棉粕对43～64日龄肉鸡胸肌主要脂肪酸组成的影响见表4。由表4可知，与CG组相比，CT组油酸含量和不饱和脂肪酸／饱和脂肪酸的比值显著增加，硬脂酸和亚油酸含量显著降低(P<0.05)，而软脂酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的含量无变化(P>0.05)；CF组除软脂酸含量显著增加外，其余脂肪酸含量均未发生显著变化(P>0.05)。试验组间各脂肪酸及饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸及不饱和脂肪酸／饱和脂肪酸的比值差异显著(P<0.05)。

2．4发酵棉粕对43～64日龄肉鸡腿肌主要脂肪酸组成的影响

发酵棉粕对43～64日龄肉鸡腿肌主要脂肪酸组成的影响见表5。由表5可知，与CG组相比，试验组亚油酸含量显著增加(JP<0.05)，软脂酸、硬脂酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的含量及不饱和脂肪酸／饱和脂肪酸的值无显著变化(P>0.05)；CT组油酸含量显著降低(fk0.05)。与CT组相比，CF组软脂酸含量显著降低，而其余脂肪酸含量及饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸及不饱和脂肪酸／饱和脂肪酸的比值变化差异不显著(D0.05)。

3 讨论

肉鸡日粮中发酵棉粕的添加对脂肪酸组成的影响可能是发酵过程中产生的代谢产物或者是酵母益生菌所引起，具体原因及对肌肉品质更为详尽的影响有待进一步研究。吴买生等陆1研究表明，在育肥猪日粮中添加复合益生菌调理剂可以增加肌肉中单不饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量，从而改善猪肉品质。王娟娟等H1研究了日粮添加中发酵饲料对生长育肥猪脂肪品质的影响，结果发现发酵饲料可显著提高猪背最长肌肌内脂肪的含量，增加油酸和总单不饱和脂肪酸的含量，降低亚油酸和总多不饱和脂肪酸的含量，对硬脂酸和软脂酸的含量没有产生明显的影响。本试验在肉鸡日粮中添加发酵棉粕，结果显示可以显著改变肉鸡主要脂肪酸组成，而且对胸肌和腿肌的影响有所差异，这种改变对43。64日龄肉鸡表现更为明显，尤其是胸肌，这说明发酵棉粕对肉鸡脂肪酸的影响具有时间效应。此外，发酵棉粕所用菌种不同也表现出了明显的差异。就43～64日龄胸肌而言，热带假丝酵母发酵棉粕显著增加其不饱和脂肪酸／脂肪酸的比值，而复合发酵棉粕显著增加其软脂酸含量。发酵棉粕对肉鸡脂肪酸组成的调节作用表明其具有改变肉鸡肌肉风味的潜力。因为不饱和脂肪酸是影响其风味的主要物质。

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