1.1 试验材料

试验所用生物发酵饲料由武汉楚天艾科生物科技集团有限公司提供。生物发酵饲料使用小麦、玉米、黄豆等作为原料，经过植物乳杆菌和酿酒酵母等发酵活菌成分的分解代谢作用，采取相应的加工工艺生产而成，其营养水平（质量分数）如下：粗蛋白质27.96%、粗脂肪3.1%、粗灰分14.71%。对照组饲料为商用品牌的小龙虾专用硬颗粒饲料，其营养水平为：粗蛋白质24.38%、粗脂肪11.33%、粗灰分7.46%。试验所用小龙虾初始体质量为（6.64±1.24）g，购自当地小龙虾繁殖场，挑选规格一致、色泽清亮、无疾病症状的个体进行试验。

1.2 试验条件与方法

养殖试验池塘位于湖北省江陵县三湖农场，选择池塘10口，生态条件基本一致，单口池塘面积约0.8hm2，按照小龙虾池塘养殖技术规程进行相应的生态条件改造，投苗前种植沉水性植物，其中以轮叶黑藻为主，面积约占池塘底部的1/2。试验组与对照组各随机选取5口池塘。试验小龙虾幼苗投放密度为25kg/667m2，投放3d后，开始投喂饲料，每天投喂2次（9：00，17：00），以下午为主，在养殖过程中根据小龙虾的生长和摄食情况做相应的调整。定期检测水体的水质指标，如氨氮、亚硝酸盐、溶解氧、pH值及硫化氢等。试验期为60d。

1.3 样品采集与分析测定

1.3.1 样品采集养殖试验结束后，对试验组和对照组随机进行取样，精确称量虾的体质量。称量完成后，每口池塘随机选取20尾虾，用1mL经肝素钠抗凝处理的医用注射器抽取血淋巴，将血淋巴置于2mL无菌EP中，4℃静置过夜后，于4℃，5000r/min离心15min，取上清液置于-80℃保存备用。然后，迅速将虾解剖，取出肝胰腺，放入无菌EP中液氮速冻后-80℃保存用于生化指标的测定。最后，取出整个腹部肌肉，称重后置于-80℃保存。

1.3.2 生长性能指标测定

WGR（%）=（mt-m0）/m0×100

SGR（%/d）=（lnmt-lnm0）/t×100

式中：mt为终末平均体质量（g）、m0为初始平均体质量（g）、t为饲养时间（d）。

1.3.3 肌肉品质指标测定

pH值的测定：分别于解剖后45min和24h检测胸肌和腿肌的pH值，分别记为pH1和pH2。将pH计的探针插入肌肉中，测定3个不同位置，取平均值；含肉率（%）=（虾腹部肌肉质量/虾体质量）×100；滴水损失：将修整好的肉样，称重记为Mdl1，装入专用塑料袋中，在4℃冰箱放置24h后，用定性滤纸轻拭去肉样表层汁液，称重记为Mdl2；滴水损失（%）=（Mdl1－Mdl2）/Mdl1×100；称取整个腹部肌肉样品，记下其重量Mcl1，放入蒸煮袋中在85℃水浴锅中蒸煮20min。蒸煮后冷却至室温，用吸水纸吸干水分，然后再次称重量Mcl2；蒸煮损失（%）=（Mcl1-Mcl2）/Mcl1×100。

1.3.4 血清非特异性免疫指标测定

血清中总蛋白（TP）、溶菌酶（LZM）、碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）采用南京建成生物工程有限公司试剂盒检测。

1.3.5 肝胰腺抗氧化指标测定

称取0.1g解冻的样品，加入0.9mL预冷的缓冲液，在冰浴条件下进行匀浆，然后于4℃、3000r/min离心10min，取上清液即为粗酶液，立即进行超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）指标的测定。肝胰腺抗氧化指标使用商业试剂盒（南京建成生物工程有限公司生产），按照说明要求操作。

1.4 数据统计与分析

所有结果均使用“平均数±标准差”表示，使用Excel和SPSS软件对结果进行统计与分析，发酵饲料组合对照组间数据差异使用单因素方差分析，采用Duncan's检验法进行多重比较，P<0.05表示差异显著。

2结果与分析

生物发酵饲料是经过益生菌发酵处理工艺后生产的含发酵豆粕和各种有益微生物等成分的新型饲料。经过发酵后，饲料中的抗营养因子减少，饲料的部分大分子成分转化成更易被动物消化吸收的小肽、氨基酸等，增加了饲料的营养价值，从而促进养殖动物生长。在本试验中，与对照组相比，生物发酵饲料组克氏原螯虾的末体重、增重率和特定生长率显著增加（P<0.05）。试验结果表明，生物发酵饲料对克氏原螯虾的生长发育有明显的促进作用，这与钟小群等研究鲤鱼，Refstie等研究大西洋鲑的结果相似。

3.2 生物发酵饲料对克氏原螯虾肌肉品质的影响

肌肉品质由多种指标共同决定，包括pH值、滴水损失率和质构特性等。含肉率是评价鱼虾等水产品的品质、经济性状和生产性能的重要指标。蒸煮损失是衡量肌肉蛋白质在加热过程中变性凝固所失水分的重要指标。朱坤等通过饲养试验发现，发酵饲料显著降低育肥猪肌肉蒸煮剪切力而提高嫩度。在本试验中，生物发酵饲料对克氏原螯虾肌肉的含肉率和蒸煮损失有显著性影响，而对pH值和滴水损失率无显著影响。这说明与投喂普通饲料相比，生物发酵饲料促进了肌肉的生长，增强了肌肉的保水性能，对肌肉品质产生一定的影响。本研究结果与钟小群等研究鲤鱼、周兴华等研究鲫鱼等得出的发酵饲料对鱼体品质未产生显著影响的结论不同，一方面可能是品种差异不同引起，另一方面可能是添加量不同所造成的。

3.3 生物发酵饲料对克氏原螯虾免疫机能的影响

对于甲壳动物而言，免疫系统不完善，免疫应答较为原始，依靠非特异性免疫来抵抗病原微生物和其他有害物质，因而可以将非特异性免疫相关的酶活性作为评价其免疫状态的重要指标。

LZM是血液中杀菌的重要物质，在防御病原入侵发挥重要作用。AKP是甲壳动物生物体内重要的代谢调节酶，在虾蟹营养物质的吸收和利用中起着重要作用，可提高虾蟹的抗病性。ACP是重要的多功能磷酸单酯水解酶，在维持动物生理机能与免疫中发挥关键作用。氧自由基在先天免疫防御系统中起关键作用，然而过多的自由基可引起氧化应激，导致脂质过氧化，细胞和组织损伤，机体的免疫能力显著下降。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的终产物，被普遍认为是氧化损伤的指示指标。同时，机体具有一套防御体系，会消除过量的氧自由基，其中SOD和CAT发挥主要的作用。

夏青等研究表明，以生物饲料作为凡纳滨对虾饲料时，虾体抗氧化指标明显提高。黄世金等发现饲料中添加发酵豆粕后罗非鱼的SOD、LZM和AKP活性显著提高。

在本试验中，与对照组相比，生物发酵饲料组血清中的LZM、AKP、ACP活性和肝胰腺中的SOD和CAT活性均显著上升（P＜0.05），而肝胰腺中的MDA活性显著下降（P＜0.05）。

本试验结果表明，生物发酵饲料提高了克氏原螯虾非特异性免疫力和抗氧化能力，减少了细胞损伤。究其原因，可能是生物发酵饲料含有的氨基酸、消化酶、核苷酸和益生菌等成分，能够增强动物机体免疫机能，促进动物健康生长。

4结 论