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枯草芽孢杆菌在固态发酵饲料中的应用研究进展

2020-04-06 17:14:59      点击:

摘要:在畜牧业生产领域,益生菌常被用作饲料添加剂以改善动物的生产性能和免疫性能。益生菌可调节动物肠道菌群、预防疾病,是良好的抗生素替代品。以枯草芽孢杆菌为代表的益生菌受到了广泛关注,再结合固态发酵技术发酵饲料使得饲料的品质得以提高。文章介绍了枯草芽孢杆菌及固态发酵技术,概述了枯草芽孢杆菌在固态发酵饲料中的作用及其在动物生产中的应用。最后,总结了枯草芽孢杆菌在固态发酵饲料中的发展前景及相关建议,以期为枯草芽孢杆菌在发酵饲料的生产上提供参考。

随着对环境保护、污染治理以及食品安全等问题的重视程度逐渐加大,无抗替抗养殖的呼声越来越高。所以,需要寻找抗生素的替代品来控制和预防致病性细菌的定植。微生态制剂是很好的替代品,微生态制剂中的枯草芽孢杆菌,具有调节宿主细胞、保护宿主细胞的功能,以支持动物健康。枯草芽孢杆菌可形成内生孢子、革兰氏阳性细菌,由于其特有的特性,它们能够对植物进行定植,产生孢子、生物膜、各种蛋白酶类物质以及短链抗真菌肽,并诱导植物激素的合成,具有很高的经济价值。枯草芽孢杆菌由于能够产生孢子而被用作动物饲料中的益生菌补充剂。与其他益生菌相比,它的热稳定性和在低pH值下生存的能力具有很大优势。此外,发酵方式也尤为重要,发酵方式主要包括固态发酵、液体发酵。现在使用较多的发酵方式是固态发酵。许多工农业副产品,如麦麸、豆粕、米糠、玉米粉、马铃薯皮、酒糟等,常被选为固态发酵的基质,用来做固态发酵饲料。一些产孢子的微生物,在固态发酵系统提供的环境下会有更好的性能和更高的产率。本文主要概述了枯草芽孢杆菌在固态发酵技术下发酵饲料所产生的作用、在动物生产中的应用、前景及相关建议。

1枯草芽孢杆菌概述

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是典型的有益菌,具有控制不同类型细胞发育的能力。枯草芽孢杆菌被生物技术公司用于工业规模化生产。枯草芽孢杆菌属革兰氏阳性菌,形成孢子的微生物,能抑制大多数有害菌的繁殖。枯草芽孢杆菌是好氧菌,具有极强的抗逆性,能在较高酸碱和温度等恶劣环境中存活。

枯草芽孢杆菌可以在动物肠道内出芽生长,产生多种酶类物质,对动物生长有很好的促进作用,在防治疾病方面也有着良好的效果。研究表明,枯草芽孢杆菌能产生胞外酶,如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、植酸酶和脂肪酶等,这些酶能够水解植物饲料细胞的细胞壁,使细胞里面的营养物质释放出来,并能消除饲料中的抗营养因子,减少抗营养因子对动物消化利用的障碍。在国内,枯草芽孢杆菌被人体摄入,可以缓解腹泻和建立健康的肠道微生物群。

枯草芽孢杆菌饲料添加剂也可调节动物肠道菌群,对动物健康生长有很大益处。此外,芽孢杆菌也有一定的生物修复用途,可以减少含氮废物,从而改善环境条件和水质。因此,有人称它为“菌中之王”。

2固态发酵

2.1 固态发酵技术简介

固态发酵(Solid-State Fermentation,SSF)是一种生物加工技术,是指微生物在湿固体颗粒上的生长,颗粒间的空隙存在少量液态水和连续气相。SSF在食品发酵工业和饲料发酵工业中有着悠久的应用历史。在亚洲,SSF用于生产面包、奶酪、曲酒、酱油、豆豉和腐乳等食品。此外,利用SSF技术已经生产了许多重要的产品,如氨基酸、酶、有机酸、纺织和生物燃料等。近几年来,SSF技术以其优于液态发酵(Submerged Fermentation,SmF)的诸多优势而获得了广泛的应用。SSF相较于SmF有许多优点,在SSF过程中,很少有废弃物产生,靠固体颗粒间隙中存留的空气向微生物提供氧气,有产量高、投资低、耗能低、污染小等一系列优点。芽孢杆菌在SSF中的生长过程中,芽孢的积累往往伴随着基质的消化和生物活性代谢物的释放。因此,SSF可以降低抗营养因子(如豆粕、棉籽粕和菜籽粕中),提高饲料的营养价值。

2.2 固态发酵的主要步骤

一般来说,SSF的主要步骤和SmF基本相同,SSF的主要步骤如图1所示。

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基质的制备:为确保基质颗粒的大小均一、合适,可能需要将其粉碎或制成粒状,基质在进入反应器之前需要进行杀菌处理,以提高营养物的可利用性。
菌种的制备:固态发酵饲料中使用较多的是产孢子的菌种,菌种可以通过液态发酵产生丝状菌种,也可通过固态发酵培养,将固体烘干制成菌粉作为菌种使用。
接种和装料:在装料之前或之后接种均可。但是,生物反应器如不能对基质进行搅拌,则必须在生物反应器外接菌。装料时一定要注意进行无菌操作,防止其他杂菌进入。大规模生产时,可选择合适的机械或设备来辅助装料。
生物反应器的运行:应注意生物反应器的操作变量,如温度、流量、压力、搅拌速度以及冷却水的温度,以便控制产品的生长,使产品达到最佳发酵条件。
出料:发酵结束后,发酵好的饲料需要从生物反应器中移出,移出的饲料需要迅速装入呼吸袋中压紧压实处理,尽量排出包装袋中的空气,可以长期保存。
后续加工:具体可按相应的工艺流程进行操作。
废弃物的处理:发酵后的废弃物如处理不当可能会对环境造成污染。所以,应对废弃物进行合理的处理,如利用微生物降解废弃物之后,再集中处理。

3枯草芽孢杆菌固态发酵饲料的作用及在动物生产中的应用

3.1 枯草芽孢杆菌固态发酵饲料的作用

3.1.1 在机体内产生酶类和营养物质

芽孢杆菌能够分泌大量的胞外酶,正是因为枯草芽孢杆菌在发酵时产生的各种酶类使蛋白质、多糖、脂肪等一些大分子营养物质可被枯草芽孢杆菌固态发酵饲料所降解,促进动物肠道吸收,提高消化率。

史艳丽等利用枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕,结果表明,抗原蛋白残留率、粗蛋白均显著高于空白对照组(P<0.05)。Dai等用枯草芽孢杆菌,通过SSF提高豆粕(SBM)的营养价值和生物活性,粗蛋白质、可溶性蛋白质、总酚、黄酮类化合物含量均有所增加。闫亚婷等以玉米为饲料原料,通过正交试验优化其发酵条件,优化后玉米粉淀粉含量下降,分解率达到37.76%,可溶性糖含量提高了1.72倍。豆渣是大豆工业产生的主要农业废弃物。为了水解豆渣并释放营养物质,Mok等采用枯草芽孢杆菌固态发酵法发酵豆渣,研究表明,用枯草芽孢杆菌发酵豆渣提高了其营养含量。用枯草芽孢杆菌发酵的豆渣,总氨基酸含量由未发酵的(3.04±0.14)mg/g增加到(5.41±1.21)mg/g。发酵后,总脂肪酸含量从(153.04±5.10)mg/g增加到(166.78±2.41)mg/g,发酵后的抗氧化剂含量(DPPH)也提高了6.4倍。由此可见,枯草芽孢杆菌固态发酵饲料可产生丰富的酶、多肽、有机酸、氨基酸等益生性物质。

3.1.2 抑菌作用

枯草芽孢杆菌固态发酵产生多种生物活性肽,包括抗菌肽、免疫活性肽和抗氧化肽。李萌等用枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕产抗菌脂肽以提高脂肽产量。结果表明,在最优条件下,抗菌脂肽的抑菌率的实际值为(75.62±0.36)%,抑菌率提升了将近一半。

3.2 枯草芽孢杆菌固态发酵饲料在动物生产中的应用

3.2.1 枯草芽孢杆菌固态发酵饲料在仔猪中的应用

枯草芽孢杆菌中的有益菌可产生多种生物活性物质,如消化酶、维生素、有机酸、小肽和促生长因子等,可显著提高仔猪的生产性能。洪文探究了枯草芽孢杆菌固态发酵工艺的条件,并以不同剂量的枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能、腹泻发病率等情况进行研究,结果表明,高剂量组仔猪的平均日增重和饲料效率比阴性对照组高,而抗生素组,中剂量组和高剂量组之间则无显著差异(P<0.05)。所有益生菌组和抗生素组腹泻指数低于阴性对照组(P<0.05)。张煜用新型枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕降解豆粕抗原蛋白,中试发酵豆粕确定发酵条件,在仔猪日粮中添加10%的发酵豆粕,促进仔猪对营养物质的消化吸收,提高仔猪生长性能。

3.2.2 枯草芽孢杆菌固态发酵饲料在畜禽中的应用

欧荣娣等利用枯草芽孢杆菌固态发酵米糠,拌入日粮中饲喂临武鸭,试验结果表明,与对照组相比,日粮中添加枯草芽孢杆菌可有效提高临武鸭平均日增重,降低料肉比和死亡率。文静等研究肉鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌对其生长性能的影响,结果表明,在基础日粮中添加0.75g/kg的枯草芽孢杆菌制剂肉鸡的日增重显著高于基础日粮(P<0.05)。

3.2.3 枯草芽孢杆菌固态发酵饲料在水产动物中的应用

水产养殖业一直在稳步增长,特别是水产养殖中的虾。然而,对虾养殖中病害的爆发阻碍了对虾产业发展的步伐。在水产养殖中使用抗生素或化疗药物来控制疾病,导致了耐药性和消费者不接受的问题。枯草芽孢杆菌作为益生菌,可成为预防对虾养殖病害爆发的良好替代物。

在人工饲养条件下,Zuenko等研究了鲤鱼肠道食糜中消化酶活性、细菌属比,结果表明,加入活菌枯草芽孢杆菌对鲤鱼肠道食糜中微生物群落的大小和结构、某些消化酶的活性、消化率和增重都有积极的影响。鲤鱼肠道食糜中微生物总数比对照组高13%,胸骨中微生物总数是对照组的3.5倍。在所研究的鱼类中,消化酶活性的提高的同时会使氮、氨和尿素含量的减少。这可能是因为肠道微生物对蛋白质有更好的吸收,更多地利用氮代谢物来合成自己的生物量。试验组鲤鱼平均日增重比对照组高25%,平均日增重35%。

4结 论

固态发酵饲料产量高、价格低、操作简单,益生菌枯草芽孢杆菌发酵产品更加安全、营养更加丰富、更容易让动物消化吸收。利用枯草芽孢杆菌固态发酵饲料可以显著增强动物免疫力,大大降低动物的发病率和死亡率。在饲料中添加枯草芽孢杆菌可以增强动物食欲,明显提高日增重、缩短饲养周期、提高了养殖经济效益。所以,随着研究工作的进一步深入,以及人们绿色、安全和环保意识的不断增强,枯草芽孢杆菌在发酵饲料中的应用前景将会更加广阔。未来,可以对复合菌种多加研究,以期找到最佳的发酵工艺条件、最佳配比及用量。

对枯草芽孢杆菌固态发酵饲料相关建议如下:①应选择优良生产的菌种,提高菌株定植能力;②固态发酵饲料原料种类繁多,应对饲料原料的质量和稳定性加已把控;③不应只注重试验研究而忽略实际应用研究,获得的试验结论要与生产实际相关联;④要严格符合发酵饲料相关的使用标准和规范。

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